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HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞(STR鑒定)

簡(jiǎn)要描述:HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞(STR鑒定)規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

  • 更新時(shí)間:2024-07-12
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問(wèn)  量:211

詳細(xì)介紹

品牌ATCC貨號(hào)YLK-XB1380h
規(guī)格1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)
英文名稱HK-2

HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞(STR鑒定)


細(xì)胞特性:

1) 來(lái)源:腎皮質(zhì)/近端小管

2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)

3) 含量:>1x106  細(xì)胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。


運(yùn)輸和保存:

干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。


細(xì)胞接收后的注意事項(xiàng):

1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的完培6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。


培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備 角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基添加對(duì)應(yīng)因子按照收到的生長(zhǎng)因子對(duì)應(yīng)規(guī)格:1mL加0.2%, 5mL 加1%,同時(shí)添加1% P/S 來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞?;蛘?nbsp;準(zhǔn)備Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019) 來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。

備注:

1. Defined K-SFM (part of kit NO:,10744-019)培養(yǎng)液包含兩個(gè)組份:基礎(chǔ)培養(yǎng)基1瓶500mL+生長(zhǎng)因子1管1mL .

2. 該細(xì)胞貼壁較慢,為使細(xì)胞貼壁更容易,建議可提前在培養(yǎng)皿/培養(yǎng)瓶中鋪0.25%的明膠溶液,并于貼壁24~48小時(shí)后再進(jìn)行后續(xù)操作。

3. 該細(xì)胞生長(zhǎng)依賴于人表皮生長(zhǎng)因子EGF,故而生長(zhǎng)不能過(guò)密,請(qǐng)?jiān)谌诤隙冗_(dá)到80%時(shí)進(jìn)行傳代。

4.使用0.05%胰/酶消化細(xì)胞,由于角質(zhì)細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基或者Defined K-SFM為無(wú)血清培養(yǎng)液無(wú)法終止胰/酶消化,所以消化完成后要通過(guò)離心(建議125xg離心5到10分鐘)(或者加入加入3-4ml用RPMI1640或者DMEM等基礎(chǔ)培養(yǎng)基配置的含10%FBS)的培養(yǎng)基來(lái)終止消化,1000rpm/5min,去除胰/酶后再加入細(xì)胞完培進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

5.Defined K-SFM是一種無(wú)血清培養(yǎng)基,添加生長(zhǎng)因子后請(qǐng)不要過(guò)濾。在無(wú)血清培養(yǎng)體系中,HK-2細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢并且需要一些時(shí)間才能貼壁,在培養(yǎng)基中看到許多圓形,漂浮和折射細(xì)胞是正常情況,不要丟棄松散附著和圓形的漂浮細(xì)胞,收集離心后可以重新加入到培養(yǎng)瓶中。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:完培92.5%,7.5%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

4)傳代比例:如果沒(méi)有特別說(shuō)明,收到細(xì)胞后的第一次傳代一般是1:2。傳代周期:4-6天,換液頻率:每周 2-3次。


細(xì)胞處理:

1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完培的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完培重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完培的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。


HK-2 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞(STR鑒定)

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