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人肺小動脈內(nèi)皮細胞

簡要描述:人肺小動脈內(nèi)皮細胞分離自肺小動脈組織;肺動脈干是短而粗的動脈,自右心室的動脈圓錐起始,向左后上方斜升,先在升主動脈根部的前面,繼而至其左側(cè),至主動脈弓的下方,約在第5胸椎高度,分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,橫行向左,經(jīng)左主支氣管前方至左肺門,分兩支進入左肺的上、下葉。

  • 更新時間:2024-07-09
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:196

產(chǎn)品分類

Product Category

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詳細介紹

品牌ATCC貨號YLK-XB0716h
規(guī)格5*10^5供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應用領域化工,生物產(chǎn)業(yè)
組織來源肺小動脈組織

人肺小動脈內(nèi)皮細胞

產(chǎn)品名稱 :人肺小動脈內(nèi)皮細胞

產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0716h

組織來源 :肺小動脈組織

產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


細胞簡介:

肺小動脈內(nèi)皮細胞分離自肺小動脈組織;肺動脈干是短而粗的動脈,自右心室的動脈圓錐起始,向左后上方斜升,先在升主動脈根部的前面,繼而至其左側(cè),至主動脈弓的下方,約在第5胸椎高度,分為左、右肺動脈。左肺動脈較短,橫行向左,經(jīng)左主支氣管前方至左肺門,分兩支進入左肺的上、下葉。右肺動脈較長,橫行向右,經(jīng)主動脈升部和上腔靜脈的后方達右肺門,分3支進入右肺上、中、下葉。左、右肺動脈的各分支在肺實質(zhì)內(nèi)又反復分支,與支氣管的分支伴行,最后達肺泡壁,形成稠密的毛細血管網(wǎng)。肺動脈輸送的是含二氧化碳較多的靜脈血。在肺動脈干分叉處稍左側(cè)與主動脈弓下緣之間有一結(jié)締組織索,稱動脈韌帶。管徑在0.3~1m m 之間,為小動脈(sm all-artery),小動脈包括粗細不等的幾級分支,也屬肌性動脈。較大的小動脈,內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒有外彈性膜??趶皆?m m 以下的動脈,管壁有完整的平滑肌層及少量的彈性纖維和膠質(zhì)纖維。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素,也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關"。典型的小動脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對比其他動脈為厚,當平滑肌在神經(jīng)支配下強力收縮時,其管腔可以wan全閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細血管內(nèi),從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。

如果有許多小動脈同時收縮,可使血壓顯著上升。反之,當小動脈的平滑肌舒張時,則可使大量的血液流入毛細血管,外周阻力明顯下降,血壓降低。終末小動脈(terminalarteri-ole)的口徑為20~30μm ;后小動脈(m etar-teriole),又稱毛細血管前小動脈(p recapil-lary arte riole)的口徑為12~15μm 。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌,在毛細血管前小動脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛細血管前括約肌(precapillary sphin c-ter),其收縮或舒張,可調(diào)節(jié)真毛細血管的血流量,是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關"。支配小動脈平滑肌的交感神經(jīng)纖維,可延伸到終末小動脈和后小動脈的平滑肌細胞。

在毛細血管前括約肌上交感神經(jīng)纖維特別豐富。肺小動脈內(nèi)皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布,該細胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。


質(zhì)量檢測

優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


培養(yǎng)信息

包被條件 : PLL(0.1m g/ml),明膠(0.1%)
培 養(yǎng)  基 : 含F(xiàn)BS、EG F、bFG F、IG F、V EG F、H eparin、H ydrocortisone、P enicil
lin、Streptom ycin等
換液頻率 : 每2-3天換液一次
生長特性 : 貼壁
細胞形態(tài) : 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 : 可傳2-3代
傳代比例 : 1:2
消 化  液 : 0.25% 胰蛋白/酶
培養(yǎng)條件 : 氣相:空氣,95% ;C O2,5%


客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 貼壁細胞消化
1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
3. 細胞收貨脫落
1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預熱)。
5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗

因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


注意事項

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決

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