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霍亂弧菌O1(VC O1)核酸檢測(cè)試劑盒熒光PCR法

簡(jiǎn)要描述:霍亂弧菌O1(VC O1)核酸檢測(cè)試劑盒熒光PCR法適用于檢測(cè)氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的霍亂弧菌O1,用于霍亂弧菌O1感染
的輔助診斷,其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。

  • 更新時(shí)間:2024-06-26
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 生產(chǎn)地址:上海
  • 訪  問  量:466

詳細(xì)介紹

品牌其他品牌CAS/
分子式/純度100
分子量/貨號(hào)YLK10210P
規(guī)格50T供貨周期現(xiàn)貨
主要用途科研應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè)

霍亂弧菌O1(VC O1)核酸檢測(cè)試劑盒熒光PCR法

【產(chǎn)品名稱】

通用名稱:霍亂弧菌O1(VC O1)核酸檢測(cè)試劑盒熒光PCR法

Name:Fluorescent PCR method of Vibrio cholerae O1 (VC O1) nucleic acid detection kit

【包裝規(guī)格】50T/盒

【預(yù)期用途】

本試劑盒適用于檢測(cè)氣管分泌物拭子、肺組織等樣本中的霍亂弧菌O1,用于霍亂弧菌O1感染

的輔助診斷,其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。

【檢驗(yàn)原理】

本試劑盒采用 TaqMan 探針法實(shí)時(shí)熒光 PCR 技術(shù),設(shè)計(jì)一對(duì)霍亂弧菌O1特異性引物,結(jié)合一條特異

性探針,用熒光 PCR 技術(shù)對(duì)霍亂弧菌O1的 DNA 進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè),用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原學(xué)

診斷。

【試劑組成】

名 稱

50T/盒

反應(yīng)液

500μL×2 管

酶液

50μL×1 管

陽性質(zhì)控品

50μL ×1 管

陰性質(zhì)控品

250μL ×1 管

說明:不同批號(hào)的試劑盒組分不可交互使用。

【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過 5 次,有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。

霍亂弧菌(Vibrio cholerae)是革蘭氏陰性菌,菌體短小呈逗點(diǎn)狀,有單鞭毛、菌毛,部分有莢膜。共分為139個(gè)血清群,其中O1群和O139群可引起霍亂。

霍亂弧菌是人類霍亂的病原體,霍亂是一種古老且流行廣泛的烈性傳染病之一。曾在世界上引起多次大流行,主要表現(xiàn)為劇烈的嘔吐,腹瀉,失水,死亡率甚高。屬于國際檢疫傳染病。


弧菌屬(Vibrio)中霍亂弧菌(V.cholerae)、引起一種烈性腸道傳染病,發(fā)病急、傳染性強(qiáng)、病死率高,屬于國際檢疫傳染病。

霍亂弧菌包括兩個(gè)生物型:古典生物型(Classical biotype)和埃爾托生物型(EL-Tor bio-type)。這兩種型別除個(gè)別生物學(xué)性狀稍有不同外,形態(tài)和免疫學(xué)性基本相同,在臨床病理及流行病學(xué)特征上沒有本質(zhì)的差別。自1817年以來,全球共發(fā)生了七次世界性大流行,前六次病原是古典型霍亂弧菌,第七次病原是埃爾托型所致。14.pngPCR技術(shù),即聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是由美國PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng))建立的。這項(xiàng)技術(shù)可在試管內(nèi)的經(jīng)數(shù)小時(shí)反應(yīng)就將特定的DNA片段擴(kuò)增數(shù)百萬倍,這種迅速獲取大量單一核酸片段的技術(shù)在分子生物學(xué)研究中具有舉足輕重的意義,極大地推動(dòng)了生命科學(xué)的研究進(jìn)展。它不僅是DNA分析常用的技術(shù),而且在DNA重組與表達(dá)、基因結(jié)構(gòu)分析和功能檢測(cè)中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

PCR可以被認(rèn)為是與發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相似的技術(shù),其結(jié)果都是以原來的DNA為模板產(chǎn)生新的互補(bǔ)DNA片段。細(xì)胞中DNA的復(fù)制是一個(gè)非常復(fù)雜的過程。參與復(fù)制的有多種因素。PCR是在試管中進(jìn)行的DNA復(fù)制反應(yīng),基本原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相似,但反應(yīng)體系相對(duì)較簡(jiǎn)單。

PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:①模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)做準(zhǔn)備;

②模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;

③引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在Taq酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA 鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈。

重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈",而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘, 2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。

【注意事項(xiàng)】

1.所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行;

2.試劑盒內(nèi)各種組分使用前應(yīng)自然融化,*混勻并短暫離心;

3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存;

4.反應(yīng)中盡量避免氣泡存在,管蓋需蓋緊;

5.使用一次性吸頭、一次性手套和各區(qū)專用工作服;

6.樣本處理、試劑配制、加樣需在不同區(qū)進(jìn)行,以免交叉污染;

7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;

8.試劑盒里所有物品應(yīng)視為污染物對(duì)待,并按照《微生物生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通則》進(jìn)行處理。

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