熒光PCR檢測(cè)試劑盒采用的是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，這種技術(shù)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
熒光PCR檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品性能：
1.操作簡(jiǎn)單：只需一次加樣，可完成cDNA合成和定量PCR實(shí)驗(yàn)，同時(shí)還可避免樣本交叉污染。
2.靈敏度高：緩沖體系中添加了提高擴(kuò)增能力的促進(jìn)因子，可檢測(cè)低至10pg的總RNA。
3.特異性強(qiáng)：預(yù)混液中添加了有效抑制非特異性擴(kuò)增的組分，可抑制引物二聚體的產(chǎn)生，定量更為精確。
4.優(yōu)秀的擴(kuò)增性能：良好的線性關(guān)系，擴(kuò)增效率可高達(dá)99%，且重復(fù)性高。
5.適用于所有機(jī)型：試劑盒中有獨(dú)立包裝的的ROXI和ROXII、可用于校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào)誤差。
PCR快速檢測(cè)試劑盒具體操作步驟如下：
1.從試劑盒中分別取出熒光反應(yīng)液、陰性對(duì)照、陽性對(duì)照。
2.在室溫下*溶解后，充分震蕩混勻，瞬時(shí)離心。
3.取出PCR八連管，放在PCR板上。
4.在PCR八連管內(nèi)分裝20μl熒光反應(yīng)液，分別向6個(gè)PCR管中加入5μL提取好的樣品核酸，其余兩個(gè)管內(nèi)分別加入5μl陰性對(duì)照和5μl陽性對(duì)照。完成后蓋上管蓋，并在右上角做好標(biāo)記。
5.將標(biāo)記好的PCR八連管放入儀器震蕩混勻后瞬時(shí)離心，取出后拿起觀察有無氣泡。
6.打開熒光定量PCR儀器，將PCR八連管放入卡槽中，蓋上儀器。
7.點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)程序，選擇新建實(shí)驗(yàn)，點(diǎn)擊運(yùn)行程序，并按照PCR八連管標(biāo)記順序依次選擇孔位信息：待測(cè)樣本、陽性對(duì)照、陰性對(duì)照。
8.點(diǎn)擊開始按鈕，運(yùn)行實(shí)驗(yàn)。
9.實(shí)驗(yàn)完成后，在屏幕查看實(shí)驗(yàn)結(jié)果，點(diǎn)擊詳細(xì)數(shù)據(jù)可查看實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，進(jìn)行數(shù)據(jù)回顧。
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